La première observation de protopla

La première observation de protoplastes est due à Klerker en 1892. En sectionnant des tissus plamolysés, il a observé des cellules sphériques sans paroi. libérées dans le milieu. Cette méthode mécanique a été reprise dans les années 70 de manière plus intensive mais ce sont les digestions enzymatiques de la paroi qui ont prévalues. Cependant, l’isolement mécanique a permis de soulever certains problèmes.
En particulier, l’isolement mécanique, en se passant de toute action enzymatique pouvait sembler plus naturel. En effet, les premiers mélanges enzymatiques utilisés étaient complexes et pouvaient contenir des impuretés préjudiciables à l’intégrité de la cellule.

La technique "mécanique" d'isolement de protoplastes s'adresse à des tissus à cellules allongées et consiste à effectuer des coupes perpendiclairement à la longueur.

-Si on sectionne des cellules en milieu hypotonique, la cellule meurt et la plupart des organites se désagrègent. En maintenant les tissus dans des conditions isotoniques bien précises, on peut récupérer des organites intacts. C'est ainsi que l'on peut obtenir des préparations homogènes de mitochondries ou de chloroplastes.
-Si on augmente la pression osmotique du milieu, on obtient la plasmolyse des cellules et une séparation physique de la membrane plasmique et de la paroi. On observe alors des protoplastes "in situ".
-Lorsqu'on sectionne transversalement le tissu, deux situations sont possibles:

A- La section passe par l'espace de rétraction. Le protoplaste intact peut sortir du cadre pariétal ainsi que divers subprotoplastes.

B- La section lèse le protoplaste. Seuls des subprotoplastes et des vacuoles sont libérés.

النتائج (العربية) 1:

الملاحظة الأولى من جبلة مجردة سبب كليركير في عام 1892. من قطع أقمشة بلاموليسيس، ولاحظ الخلايا كروية دون الجدار. صدر في المتوسط. أدمج هذا الأسلوب الميكانيكي في السبعينات بطريقة أكثر كثافة ولكن هذه هي ديجيسشنز الانزيمية الجدار التي لوحظت. ومع ذلك، سمح عزلة الميكانيكية إثارة بعض المشاكل.على وجه الخصوص، يمكن أن يبدو من الطبيعي أكثر عزلة الميكانيكية، تمرير أي عمل الانزيمية. والواقع أن أول إنزيم الخلائط المستخدمة معقدة ويمكن أن تحتوي على الشوائب الضارة بسلامة الخلية.تقنية "الميكانيكية" لعزل بروتوبلاستس يخدم أنسجة خلايا ممدود وهو قطع بيربينديكلايريمينت على الطول.-إذا هو يقسم الخلايا في بيئة ناقص التوتر، يموت الخلية والعضيات معظم تتفكك. الآن يمكن استرداد الأقمشة في ظروف محددة متساوي التوتر، العضيات سليمة. لذلك، يمكنك الحصول على الأعمال التحضيرية متجانسة من الميتوكوندريا أو الجبيلة.-إذا يزيد من الضغط الاسموزي المتوسط، يحصل فيها أحد بلاسموليسيس خلايا وفصل المادي للأغشية البلازمية والجدار. هناك ثم بروتوبلاستس 'في الموقع'.-Lorsqu'on sectionne transversalement le tissu, deux situations sont possibles:A- La section passe par l'espace de rétraction. Le protoplaste intact peut sortir du cadre pariétal ainsi que divers subprotoplastes.B- La section lèse le protoplaste. Seuls des subprotoplastes et des vacuoles sont libérés.

النتائج (العربية) 2:

ومن المقرر أن جبلة مجردة Klerker الملاحظة الأولى في عام 1892. وبحلول قطع plamolysés الأنسجة لاحظ خلايا كروية دون الجدار. صدر في المتوسط. اعتمد هذه الطريقة الميكانيكية في ال 70 أكثر كثافة ولكن هذا هو الهضم الأنزيمية للجدار التي كانت سائدة. ومع ذلك، ساعدت العزلة الميكانيكية تثير بعض المشاكل.
وعلى وجه الخصوص، وعزل الميكانيكية، والقيام دون اتخاذ أي إجراء الأنزيمية يمكن أن يبدو أكثر طبيعية. في الواقع، كانت مخاليط الانزيم الأولى التي استخدمت معقدة ويمكن أن تحتوي على شوائب ضارة على سلامة الخلية. و"الميكانيكا" تقنية عزل البروتوبلازم هي للأقمشة والخلايا ممدود هو إجراء تخفيضات perpendiclairement في طول. ، إذا مقطوع الخلايا في المتوسط ​​منخفض التوتر، تموت الخلية ومعظم العضيات تتفكك. الحفاظ على الأنسجة في ظروف متساوي التوتر محددة يمكن استرداد عضيات سليمة. وهكذا، يمكن للمرء الحصول على الاستعدادات متجانسة من الميتوكوندريا أو البلاستيدات الخضراء. -إذا يزيد من الضغط الاسموزي من المتوسط ​​يتم الحصول على انحلال الجبلة من الخلايا والفصل المادي بين غشاء البلازما والجدار. ثم لوحظ جبلة مجردة "في الموقع". ، وعندما مقاطع عرضية الأنسجة، حالتين ممكنة: يمر القسم أ- من خلال الفضاء التراجع. والبروتوبلازم سليمة قد إنهاء جزء الجداري وsubprotoplastes مختلف. ب القسم البروتوبلازم المس بالذات الملكية. لا يفرج عنهم إلا subprotoplastes والفجوات.

النتائج (العربية) 3:

أول ملاحظة هي بسبب البروتوبلاست klerker عام 1892.plamolys é s قطع الأنسجة، انه لاحظ وجود خلايا كروية الجدار.الإفراج عن متوسطة.بالفعل هذه الطريقة الميكانيكية في السبعينات أكثر كثافة، ولكن هذه الإنزيمات المذكورة جدار الجهاز الهضمي.ومع ذلك، ماكينات فصل بعض المسائل التي أثيرت.على وجه الخصوص، آلة فصل، من خلال أي وظيفة الانزيم هو ربما الأكثر طبيعية.في الواقع، في وقت مبكر من مزيج من الانزيمات معقد في الاستخدام قد تحتوي على شوائب ضارة على سلامة الخلايا."آلة" تقنية فصل البروتوبلاست هو ممدود على طول perpendiclairement الخلايا و الأنسجة.إذا نحن يمكن أن انخفاض نفاذية متوسطة في الخلايا من الموت، معظم عضيات التفكك.في هذه المنظمة في مثل حالة تسلل واضحة، يمكن استعادة كامل الجهاز الخلوي.لذا، يمكننا الحصول حتى إعداد الميتوكوندريا أو البلاستيدات الخضراء.إذا كان لنا أن زيادة الضغط الاسموزي متوسطة الجودة، تم فصل غشاء الخلية الجدار، الجدار و الفيزياء.ثم نلاحظ البروتوبلاست "في الموقع".عندما نضع التنظيم الأفقي، في كل الحالات الممكنة.هناك جزء من خلال تقلص الفجوة.البروتوبلاست إطار متكامل من مختلف subprotoplastes الفص الجداري.الجزء باء تضر البروتوبلاست.......فقط subprotoplastes و الخلية عنهم.